Magister en Ciencias Agrarias

ZAPPACOSTA, Diego C.
"Estudio de algunas respuestas de defensa en la interacción cebolla-Phoma terrestris y obtención de variantes con mayor tolerancia".
Director: Néstor R. Curvetto.

RESUMEN
La cebolla es un cultivo de gran importancia en el sur argentino, mas particularmente en la zona bajo riego del Valle Bonaerense del Río Colorado. Uno de los problemas a los que se enfrenta el cultivo lo constituyen las enfermedades, entre las que se encuentra la raíz rosada, causada por el hongo Phoma terrestris. El propósito de la tesis fue profundizar el conocimiento en la interacción cebolla - P. terrestris con la intención de desarrollar un sistema de selección in vitro de materiales de mayor tolerancia-resistencia al patógeno y como modelo para estudiar la interacción. Se evaluaron distintos modelos in vitro para estudiar la interacción. En dos de ellos, se cultivaron callos y plantas de genotipos de cebolla susceptibles a raíz rosada (Valcatorce y T-412) y de la especie resistente A. fistulosum, en medios de cultivo con 10% de filtrado estéril de cultivos líquidos de P. terrestris y luego de 30 días de cultivo se evaluó el crecimiento en biomasa. El crecimiento fue inhibido significativamente en los genotipos susceptibles y no en callos y plantas de A. fistulosum. También se evaluó otro modelo in vitro de la interacción enfrentando en cajas de Petri callos de los tres genotipos anteriores y micelio del patogeno (cultivos duales), obteniéndose una respuesta similar a la anterior. Entre los modelos in vitro estudiados en la interacción, i.e. callo-filtrado, planta-filtrado y callo-micelio, los dos primeros modelos demostraron poder discriminar entre genotipos de Allium susceptibles y resistentes en base a su crecimiento en biomasa. Para evaluar la participación de proteínas relacionadas a la patogenesis en la interacción Allium spp. - P. terrestris en el modelo in vivo y en los modelos in vitro, se evalúo la actividad total de enzimas peroxidasas, quitinasas y 1,3-?-glucanasas en extractos de raíces de bulbos de cebolla cv. Valcatorce cultivados en tierra inoculada con P. terrestris y sin inocular y en extractos proteicos de callos y raíces de plantas cultivadas en medios selectivos (con filtrado o co-cultivados con micelio) y medios control de los tres genotipos mencionadas previamente. El estudio de las proteínas de defensa, nos permite seleccionar la actividad de las b-1, 3-glucanasas como el mejor marcador de resistencia, ya que tanto en los modelos in vitro como in vivo presentan un comportamiento que puede relacionarse tanto a la resistencia por sus altos valores de actividad constitutiva, como a la susceptibilidad; es decir, con bajos valores de actividad constitutiva y elevación de la actividad en los tejidos expuestos al patógeno o a filtrados. La actividad de las otras enzimas evaluadas presentó variaciones entre los modelos como en el caso de las peroxidasas o bien presento una alta variabilidad dentro de los tratamientos como ocurrió con las quitinasas.

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